ECL

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ECL是一种化学发光试剂。

正文

ECL在化学领域,是一种化学发光试剂。electrochemiluminescence

化学发光试剂,

一般是WesternBlot的最后一步,加入1:1的溶液A和溶液B,覆盖pvdf膜,可以显色来观察实验结果。

原理:

一般使用的发光液A和B分别是 鲁米诺过氧化氢 ,在辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用下,鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物,过氧化物不稳定随即分解,形成一种能发光的电子激发中间体,当后者由激发态返回至基态,就会产生荧光。

在发光过程中不需要消耗 HRP ,HRP只是起催化作用,所以只要HRP没降解失活,是可以重复加发光液的。但HRP作为一种 蛋白酶 ,在室温放置时间过长,是会降解的;同时在发光过程中有什么物质(比如 显影液 )污染了膜的话,也有可能灭活膜上的HRP。

外文名
类型